目前WS 310中要求每周必須做一次生物監(jiān)測(cè),在涉及到植入物或外來器械的監(jiān)測(cè)中也需要做生物監(jiān)測(cè)。本期我們來看一看生物指示物在選取微生物上的幾個(gè)基本要求。
本質(zhì)上來說生物指示物和化學(xué)指示物類似,兩者都起到“信號(hào)燈”的作用,表面其放置的位置是否被成功滅菌(芽孢被殺死,化學(xué)指示卡變色)。根據(jù)生物指示物國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 11138系列,在蒸汽滅菌中選取了Geobacillus stearothermophilus 嗜熱脂肪桿菌芽孢作為監(jiān)測(cè)用生物指示物。而微生物界種類繁多,有真菌,細(xì)菌,病毒等多種微生物可選。那么選取某特定微生物作為生物指示物的依據(jù)有哪些呢?
1.
生物指示物在一個(gè)滅菌過程中不能太過簡單就被殺滅。其被滅菌的難度必須是最高的,或者起碼高于危險(xiǎn)的致病性微生物。如何界定一個(gè)微生物在特定滅菌過程中的抗力高低?這里D值的概念就凸顯了出來。在實(shí)驗(yàn)室中我們發(fā)現(xiàn)微生物在被滅殺時(shí),每隔一個(gè)固定的時(shí)間段其數(shù)目就會(huì)被降低為之前的十分之一。這個(gè)固定的時(shí)長就是D值,它代表了一個(gè)微生物被殺滅的難度系數(shù)。
2.
出于對(duì)操作人員的保護(hù),生物指示物中的微生物必須是對(duì)人體而言沒有危害的。所以在供應(yīng)室的工作中我們不必要擔(dān)心接觸到生物指示物而帶來的風(fēng)險(xiǎn)。其實(shí)把一百萬個(gè)生物指示物微生物吃下去也沒有任何問題——當(dāng)然味道可能會(huì)差一點(diǎn)。
3.
這一點(diǎn)需要從兩方面理解。第一,菌種數(shù)目需要保持穩(wěn)定。在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中微生物處在一個(gè)干燥,沒有食物且溫度不適合的條件下,菌種有可能會(huì)隨著儲(chǔ)存而數(shù)量不斷降低。ISO 11138-1中提出菌種數(shù)目的可接受范圍為-50%~+300%。也就是說最少不能低于標(biāo)定數(shù)目的一半。當(dāng)然也不能太多,最多不可以超過標(biāo)定數(shù)目的3倍。第二,菌種對(duì)特定滅菌條件的抵抗力必須保持穩(wěn)定——即D值必須保持穩(wěn)定。如果儲(chǔ)存2年后此微生物變得極容易被滅殺,這顯然不符合監(jiān)測(cè)目的。
“在滅菌條件下難以被殺死,對(duì)人體無害,儲(chǔ)存時(shí)數(shù)目與抗力都可以保持穩(wěn)定?!?/span>以這三點(diǎn)作為要求,人類在自然界中發(fā)現(xiàn)只有“芽孢”這一特殊狀態(tài)的微生物能夠同時(shí)滿足。值得一提的是,芽孢是由細(xì)菌轉(zhuǎn)化而來,并且可以互相轉(zhuǎn)化。具體細(xì)菌與芽孢的區(qū)別我們會(huì)在之后推送談及。
當(dāng)然,自然界中也是有著很多不同種類的芽孢,它們之間差別也很可能很大,尤其是在不同的滅菌條件下抗力不同。經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)證明,ISO 11138中公認(rèn)嗜熱脂肪芽孢桿菌為濕熱滅菌中抗力最高的芽孢。標(biāo)準(zhǔn)中也同樣給出了不同滅菌過程中所應(yīng)該選取的微生物。
從表格中可以看到,蒸汽、低溫甲醛和過氧化氫滅菌建議的菌種都為嗜熱脂肪芽孢桿菌(當(dāng)然對(duì)過氧化氫其實(shí)還存在很多爭議),對(duì)環(huán)氧乙烷和干熱建議為枯草芽孢桿菌。但是各自的自含式生物指示物是不可以共用的。甲醛的生物指示物菌管中培養(yǎng)液成分更復(fù)雜,過氧化氫還要注意芽孢的載體(尤其不可以使用纖維素材料)。不過在培養(yǎng)的過程中倒是可以放在同樣的培養(yǎng)器或溫箱中,因?yàn)橥N芽孢最適宜的培養(yǎng)溫度都是一樣的。
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